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技術(shù)文章

放免試劑盒操作原理及作用
點(diǎn)擊次數(shù):3728 更新時(shí)間:2017-07-04

放免試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中大鼠白介素6(IL-6)水平。用純化的大鼠白介素6(IL-6)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入白介素6(IL-6),再與HRP標(biāo)記的白介素6(IL-6)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的白介素6(IL-6)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中大鼠白介素6(IL-6)濃度。
大鼠白介素6試劑盒操作步驟
. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。
2. 加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品0μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。
3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。  
4. 配液:將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用
5. 放免試劑盒洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。
7. 溫育:操作同3。
8. 洗滌:操作同5。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃
避光顯色5分鐘.
0. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
. 測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應(yīng)在加終止液后5分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
保存條件及有效期
.試劑盒保存:;2-8℃。
2.大鼠白介素6(IL-6)試劑盒有效期:6個(gè)月
黃花菜木脂素A    含量:    ≥95%    Cleomiscosin A    進(jìn)口,*
黃芪皂苷-Ⅰ    含量:    ≥98%    AstragalosideⅠ    進(jìn)口/國產(chǎn)
黃芪皂苷-Ⅱ    含量:    ≥98%    Astragaloside -Ⅱ    現(xiàn)貨供應(yīng)
黃芪皂苷-Ⅲ    含量:    ≥98%    Astragaloside -Ⅲ    *
假荊芥屬苷    含量:    >96%    Nepetin-7-glucoside    進(jìn)口/國產(chǎn)
梔子苷    含量:    ≥98%    Geniposide    現(xiàn)貨供應(yīng)
放免試劑盒

 

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