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ELISA常用方法對比
點擊次數(shù):971 更新時間:2016-10-18

 ELISA常用方法對比

我們知道,ELISA可分為多種類型測定,是一種廣泛應(yīng)用在測定液體樣本中的蛋白、抗體、或激素的免疫分析技術(shù)。 我公司技術(shù)部將各種ELISA常用方法的優(yōu)勢劣勢進行對比,結(jié)果如下:

 

一、間接法:此測定方法與直接法類似,差別在于一級抗體沒有酶標(biāo)記,改用酶標(biāo)記的二級抗體去辨識一級抗體來測定抗原量。

優(yōu)勢:二抗可以加強信號,而且有多種選擇能做不同的測定分析。不加酶標(biāo)記的一級抗體則能保留它zui多的免疫反應(yīng)性。

劣勢:交互反應(yīng)發(fā)生的機率較高。

二、雙抗體夾心法:被檢測的抗原包被在兩個抗體之間,其中一個抗體將抗原固定于固相載體上,即捕捉抗體。另一個則是檢測抗體,此抗體可用酶標(biāo)記后直接測定抗原的量;或不標(biāo)記,再透過酶標(biāo)記的二級抗體來測定抗原的量。這兩種抗體必須小心選取,才可避免交互反應(yīng)或競爭相同的抗原結(jié)合部位。

優(yōu)勢:高靈敏、高專一性,抗原無須事先純化。

劣勢:抗原一定得擁有兩個以上的抗體結(jié)合部位。

三、直接法:將抗原直接固定在固相載體上,加入酶標(biāo)記的一級抗體,即可測定抗原總量,此一級抗體的特異性非常重要。

優(yōu)勢:操作手續(xù)簡短,因無須使用二抗可避免交互反應(yīng)。

劣勢:試驗中的一抗都得用酶標(biāo)記,但不是每種抗體都適合做標(biāo)記,費用相對提高。

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