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ELISA試劑盒的三項(xiàng)
點(diǎn)擊次數(shù):1005 更新時(shí)間:2016-09-09

ELISA試劑盒的三項(xiàng)
. 酶和底物:在ELISA中zui常用的酶為HRP和ALP。
2. 抗原  
在ELISA中應(yīng)用的抗原要求有較高的特異性、ELISA試劑盒親和力和純度。主要有3類,即自然抗原、人工合成抗原和基因重組抗原。自然抗原的純度不高,特異性不強(qiáng);合成抗原一般為多肽片段,缺乏天然抗原所具有的立體結(jié)構(gòu)表位,親和力不高,可能導(dǎo)致相應(yīng)表位的抗體漏檢;基因重組抗原具有安全、特異性強(qiáng)、親和力高、產(chǎn)量大等特點(diǎn),是一種比較理想的抗原,但其純化比較困難。 
3. 抗體  
在ELISA中應(yīng)用的抗體可分為多克隆抗體ELISA試劑盒(多抗)和單克隆抗體(單抗)。多抗取白免疫動(dòng)物的抗血清,制備較簡單,但抗血清成分復(fù)雜,除含針對(duì)抗原(多個(gè)表位)的抗體外,還含有多種其他抗體,親和力和特異性相對(duì)要低于單抗,且制備周期長,批間差異較大。而單抗僅針對(duì)抗體的單一表位,親和力和特異性均較多抗高,ELISA試劑盒且制備技術(shù)成熟,產(chǎn)量大,批間差異小,但結(jié)合位點(diǎn)的單一也正是其弱點(diǎn)之所在,在雙抗體夾心法中,如包被和指示抗體使用同一單抗,則由于結(jié)合位點(diǎn)的缺乏,容易造成假陰.性結(jié)果。在使用雙單抗一步法時(shí),應(yīng)注意抗原過剩時(shí)的“鉤狀效應(yīng)"。

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