亚洲免费av,农免费一区二区三区三,91精品国产品,九一99一区二区三区

當(dāng)前位置:首頁 > 技術(shù)文章

技術(shù)文章

探針法熒光定量RT-PCR試劑盒的RNA提取方法有哪些?
點擊次數(shù):891 更新時間:2023-06-25
  探針法熒光定量RT-PCR技術(shù)是一種基于實時熒光標(biāo)記的定量PCR技術(shù),可以精確地測定目標(biāo)RNA的表達(dá)量。而要正確地進行探針法熒光定量RT-PCR實驗,首先需要提取高質(zhì)量的RNA。本文將詳細(xì)介紹探針法熒光定量RT-PCR試劑盒的RNA提取方法的分類、原理、操作流程和注意事項。
 
  一、RNA提取方法的分類
 
  RNA提取方法可以根據(jù)提取液的種類、提取步驟的數(shù)量和提取原理等方面進行分類。
 
  根據(jù)提取液的種類,RNA提取方法可分為有機溶劑法和離子交換法。有機溶劑法是利用有機溶劑,如異丙醇、乙醇等,沉淀核酸,從而分離出RNA。離子交換法是利用離子交換樹脂,將RNA與DNA分離。
 
  根據(jù)提取步驟的數(shù)量,RNA提取方法可分為一步法、兩步法和多步法。一步法是指將樣品裂解后,直接加入有機溶劑或離子交換樹脂進行沉淀和分離。兩步法是指將樣品裂解后,先進行核酸沉淀,再進行RNA的分離。多步法是指樣品裂解后,經(jīng)過多個步驟的沉淀、洗滌和分離,得到純凈的RNA。
 
  根據(jù)提取原理,RNA提取方法可分為吸附劑法和溶解劑法。吸附劑法是利用吸附劑,如硅膠、氧化鋁等,將RNA吸附,再通過洗脫液洗脫。溶解劑法是利用酸性溶液,將RNA溶解,再通過調(diào)節(jié)pH值沉淀RNA。
 
  二、RNA提取的操作流程
 
  RNA提取的操作流程一般包括以下幾個步驟:
 
  1.樣品準(zhǔn)備:選擇適合的組織或細(xì)胞樣品,將其破碎或溶解。
 
  2.裂解:加入裂解液,將細(xì)胞或組織破碎,釋放出核酸。
 
  3.核酸沉淀:加入有機溶劑或離子交換樹脂,將核酸沉淀下來。
 
  4.RNA溶解:去除沉淀物中的DNA和蛋白質(zhì),得到純凈的RNA。
 
  5.RNA沉淀:加入有機溶劑或離子交換樹脂,將RNA沉淀下來。
 
  6.洗滌:用洗滌液洗滌沉淀物,去除殘留的有機溶劑和離子。
 
  7.溶解:用無RNA酶的水或緩沖液溶解RNA,得到純凈的RNA溶液。
 
  三、RNA提取的注意事項
 
  在RNA提取過程中,需要注意以下幾點:
 
  1.避免RNA酶的污染:RNA酶是RNA降解的主要原因,因此在RNA提取過程中需要避免RNA酶的污染。使用無RNA酶的工具和容器,以及進行嚴(yán)格的滅菌處理是避免RNA酶污染的重要措施。
 
  2.保證操作條件的恒定:RNA提取過程中需要保證操作條件的恒定,如溫度、pH值等,以避免RNA的降解和變性。
 
  3.避免DNA的污染:DNA對RNA定量和定性分析有一定干擾,因此在RNA提取過程中需要避免DNA的污染。選用合適的吸附劑和洗滌液,進行洗滌和去除殘留的DNA是避免DNA污染的重要措施。
 

 

分享到:

加入收藏 | 返回列表 | 返回頂部

©2025上海谷研實業(yè)有限公司 版權(quán)所有  總訪問量:392925 Design By 環(huán)保在線 
主營:補體片斷5aElisa試劑盒,花生四烯酸Elisa試劑盒,維生素DElisa試劑盒 GoogleSitemap   備案號:滬ICP備12048703號-8

聯(lián)系人: 馬先生
電話:
021-39921927,021-39596320
手機:
15026555973
點擊這里給我發(fā)消息
點擊這里給我發(fā)消息
 

環(huán)保在線

推薦收藏該企業(yè)網(wǎng)站
在线观看黄色 av| 亚洲电影黄色片久久| www免费大香蕉一区二区三区| 精品人人1995| 中文字幕一区日韩电影| 欧美丝袜人妻另类| 国产盗攝一区二区| 亲子伦一区二区三区视频| 中文字幕欧美精品一区| 亚洲自拍偷拍二| 欧美亚洲综合二区| 美女国产成人网站网站| 日韩国产精品久久久久亚洲| 美女91在线播放| 人妻久久久网| 黄色午夜精品久久| 欧美日韩在线免费观看nv| 丝袜久久久少妇| 蜜桃婷婷网| 色熟妇熟妇熟妇| sashagrey无码欧美视频| 亚洲精品中文字幕视频社区| 国产日韩欧美性爱网| 一区二区大神多| 午夜一区不卡视频| 国产一区二区三区乱码| 成年人熟妻日韩欧美一区二区| 国产婷婷99| 欧美 国产 中文 日韩| 3p欧美一区| 黄色小说在线一区| 成人社区五月天婷婷基地| 男女艹鸡扒www.| 91熟女半推半就对了白在线| 虎逼美女被操| 啊快插快啊快啊| 欧美激情偷拍家庭| 日韩精品中文字幕av| 久久精品中字| 天天有再黄的免费视频| 欧洲国际三级片一区二区|