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技術(shù)文章

大鼠小腸粘膜上皮細(xì)胞細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程
點擊次數(shù):965 更新時間:2022-06-16

大鼠小腸粘膜上皮細(xì)胞細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:

一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:

1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。

2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。

二.細(xì)胞處理:

1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用

對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:

方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

Saos-2,人成骨肉瘤細(xì)胞

Caco-2,人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞

NCI-N87 [N87]人胃癌細(xì)胞

MGC80-3(MGC-803)人胃癌細(xì)胞

EC109,人食管癌細(xì)胞

HGC-27人胃癌細(xì)胞

AGS人胃腺癌細(xì)胞

U251人膠質(zhì)瘤細(xì)胞

THP-1人單核白血病細(xì)胞

HuH-7人肝癌細(xì)胞

RBE, 人肝膽管癌細(xì)胞

MiaPaCa-2, 人胰腺癌細(xì)胞

KM3, 人多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞

QGY-7701, 人肝癌細(xì)胞

PANC-1, 人胰腺癌細(xì)胞

U266B1 [U266], 人多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞

Hep G2, 人肝癌細(xì)胞系

PC-12(高分化),PC12,大鼠腎上腺髓質(zhì)嗜鉻瘤分化細(xì)胞株(高分化)

GH3, 大鼠垂體生長激素腺瘤

Hepa 1-6, 小鼠肝癌細(xì)胞

QBC-939, 人膽管癌細(xì)胞

B16-F10, 小鼠黑色素瘤高轉(zhuǎn)移細(xì)胞

SGC-7901, 人胃腺癌細(xì)胞系

SK-N-SH, 人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞

SK-MEL-1, 人皮膚黑色素瘤細(xì)胞

A549, 人肺癌細(xì)胞系

A-375 [A375], 人惡性黑素瘤細(xì)胞株

A549/DDP, 人肺腺癌耐藥細(xì)胞株


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